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外泌体培养基你选对了吗?
来源: | 作者:瑞芯智造 | 发布时间: 2022-11-25 | 257 次浏览 | 分享到:
纳米库尔特粒度仪(电阻法RPS)可在单颗粒水平对外泌体进行粒径浓度分析,可无标记直接检测任何培养基类型的细胞培养上清中的外泌体,精准得到外泌体样本中的完整、真实的粒径浓度分布,并且3-5分钟即可完成检测,是外泌体培养工艺开发中的得力助手,可助力筛选*佳的培养基以及培养条件。

外泌体(exosome)是一种由细胞内多泡体(multivesicular body,MVB) 与细胞膜融合后,分泌到细胞外基质中的膜性囊泡。在正常的生理过程中发挥着介导细胞间通讯的重要功能,可用于监测临床状态,治疗反应,疾病进展等,同时由于它们具有递送生物分子的功能,因此它们还有发展成临床药物递送载体的潜力。


外泌体产生于所有类型的动植物细胞,并且不同细胞、不同生长状态的细胞分泌的外泌体差异性很大,因此,为了得到更高浓度、异质性相对较小的外泌体,细胞培养上清是外泌体的*佳来源途径,细胞培养上清中外泌体浓度低、粒径小、粒径分布广(30-150nm,可能有大囊泡存在),实时定量监控外泌体分泌情况是工程化外泌体生产的重点也是难点。


纳米库尔特粒度仪(电阻法RPS)可在单颗粒水平对外泌体进行粒径浓度分析,可无标记直接检测任何培养基类型的细胞培养上清中的外泌体,精准得到外泌体样本中的完整、真实的粒径浓度分布,并且3-5分钟即可完成检测,是外泌体培养工艺开发中的得力助手,可助力筛选*佳的培养基以及培养条件。


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筛选无外源性培养基

传统的培养基都会用到牛血清以补充细胞所需营养,但血清会或多或少引入外源性的外泌体,从源头上造成了后续外泌体样本的污染。通过其他成分代替牛血清,或者经过分离除去外泌体,已经有各种类型的无外源性外泌体培养基上市,但都真正做到了零污染吗?针对这种疑问,笔者选取了八种不同的声称无外源性外泌体的培养基进行测试。
图1.外泌体培养基测试



通过测试可见,并非所有的培养基都做到了真正的无外源性外泌体,还需擦亮您的眼睛,借助纳米库尔特粒度仪对其进行严格的筛选,挑选合适的培养基。

02


培养条件优越

在通常的外泌体培养过程中,都是分离富集后再进行测定,若纯度过低或含量太少,不符合下游研发需求,则需要重新进行培养,消耗大量的时间成本;亟需一种准确、可靠和快速的方法实时监控细胞培养过程中外泌体的分泌含量,使科研工作事半功倍,纳米库尔特粒度仪十分符合这种应用场景,使外泌体的研发更高效。


图2.外泌体培养上清实时跟踪测试


在对某培养条件的细胞上清进行跟踪测试后发现,外泌体的浓度在培养第5天时达到峰值,往后浓度有所降低,并且粒径分布也有所变化。

总结

纳米库尔特粒度仪(电阻法RPS)在外泌体生产工艺研发应用中有以下优势:
1、方便快捷,可以做到实时监测。
2、与样本折射率无关,可应对各种成分的培养基。
3、单颗粒检测,大小囊泡之间无互相影响,可得到真实的粒径分布数据。
4、直接检测外泌体体积粒径,粒径准确度媲美电镜。


5、精准的浓度测量,可分析不同粒径范围内的颗粒浓度。